玉米HVA22基因启动子的克隆与功能验证
时间： 2014-10-24 点击次数：次
Journal: 核农学报，2014,28（4）:0560-0568
Author: 陈佳佳； 牟巍； 周树峰； 李晚忱； 付凤玲
Abstract:
利用转基因技术转化利用外源抗性基因,可提高玉米对非生物逆境的抵抗能力,改良其在不良环境下的稳产性。但是,在过去的研究中,大多采用组成型启动子启动外源抗逆基因过量表达,虽然可以改良转基因株系的抗逆性,但其生长发育受到不同程度抑制,适应性代价较大。用非生物逆境诱导启动子,可培育出只在逆境胁迫下表达的转基因抗逆品种,避免正常条件下抗逆基因过量表达的不良影响。本研究以水稻HVA22蛋白质的氨基酸序列为探针,搜索玉米基因组同源mRNA序列HVA22,用PlantCARE软件分析并同源克隆其上游启动子序列,实时荧光定量PCR验证HVA22基因在非生物逆境胁迫下的差异表达,构建HVA22基因启动子HVA22s启动GUS基因的表达载体,基因枪法转化玉米愈伤组织,GUS染色检测启动活性。结果表明,玉米HVA22s启动子长度1478 bp,含有多种与非生物逆境应答相关的调控元件。HVA22基因在高温胁迫,以及脱落酸和乙烯诱导下上调表达。用HVA22s启动GUS基因转化的玉米愈伤组织,在脱落酸诱导、甘露醇模拟高渗处理、低温和高盐胁迫条件下,GUS染色均可显现靛蓝色斑点,说明HVA22s启动子确有非生物逆境启动功能,进一步验证其启动活性后可运用于玉米抗逆转基因研究。
Link: http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=8&CurRec=17&recid=&filename=HNXB201404003&dbname=CJFDLAST2014&dbcode=CJFQ&pr=&urlid=&yx=&uid=WEEvREcwSlJHSldRa1FhcXVLSVFFSWRCVUd4R0NvbjlhSVFXZm0vYkxtOXAxdnFQUVRsTys4QlRYWFN0MTR6WXp3PT0=$9A4hF_YAuvQ5obgVAqNKPCYcEjKensW4IQMovwHtwkF4VYPoHbKxJw!!&v=MjAyMjJQVGJMRzRIOVhNcTQ5Rlo0UjhlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTDZlWitSckZ5SGxWTHpOTFM=
© 2017 四川农业大学玉米研究所 官网：https://maize.sicau.edu.cn
地址(邮编): [四川省雅安市新康路46号(625014) | 成都市温江区惠民路211号(611130)] 电话: [成都:028-86290916 | 雅安:0835-2882455]
